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2020-12-31
基因編輯、基因敲除小鼠模型基本流程
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       什么是基因編輯?

       基因編輯是指通過添加、替換和刪除 DNA 堿基直接改變 DNA 序列的方法。



       CRISPR/CAS 是細(xì)菌的一種免疫防御機(jī)制,通過短 RNA 可特異性切斷噬菌體 DNA 序列。利用該原理,在真核生物 DNA 上產(chǎn)生缺口,啟動(dòng)損傷修復(fù),實(shí)現(xiàn)基因編輯。


全身基因敲除?。▊})鼠服務(wù)


      采用 CRISPR/CAS9 短的非編碼 RNA 指導(dǎo)的 DNA 核酸內(nèi)切酶系統(tǒng),在基因組上產(chǎn)生突變或缺失,獲得基因敲除?。▊})鼠。  

特色:采用 CS-STOP 的方法,同時(shí)獲得 CS-STOP 基因敲除小鼠和移碼突變小鼠,在二代以內(nèi)獲得可用于觀察表型的純合敲除小鼠。

服務(wù)流程

     條件型全身基因敲除?。▊}) 鼠服務(wù)采用 CRE/LOXP 同源重組系統(tǒng),根據(jù)客戶需要,在基因組序列上插入同向雙 LOXP 序列


       獲得條件型基因敲除?。▊})(CKO) 鼠。當(dāng) CKO 小鼠與組織特異性表達(dá) Cre 酶的工具鼠進(jìn)行配繁,根據(jù) CRE 表達(dá),在特異性的組織或細(xì)胞中敲除。

條件型敲除流程

       設(shè)計(jì)特異性同源突變位點(diǎn),采用 CRISPR/Cas9 基因編輯技術(shù),修飾小鼠基因組序列,導(dǎo)入突變或外源基因, 建立擬人化臨床疾病突變病模型。

       小鼠倉鼠活體細(xì)胞熒光示蹤模型細(xì)胞分化和個(gè)體發(fā)育是由基因的時(shí)空表達(dá)差異決定的。


       利用 CAS9 技術(shù), 可以在基因編碼的 5’ATG 起始端或終止子,插入熒光蛋白報(bào)告基因,示蹤基因的時(shí)空表達(dá)譜。










作者:未知 來源:丁香通
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